槲皮素通过Bim-Bak/Bax途径提高顺铂耐药膀胱癌细胞对顺铂敏感性的研究

目的 探讨槲皮素能否逆转膀胱癌细胞对顺铂的耐药性并研究其机制。方法 MTT法检测顺铂耐药T24膀胱癌细胞在顺铂和槲皮素处理下的细胞活力。流式细胞实验检测顺铂耐药T24膀胱癌细胞在顺铂和槲皮素处理下的细胞凋亡。Western blot试验检测顺铂耐药T24膀胱癌细胞在顺铂和槲皮素处理下Bim、活化caspase-9、活化caspase-3的表达水平以及细胞色素c、Smac/DIABLO的释放。免疫共沉淀实验检测顺铂耐药T24膀胱癌细胞在顺铂和槲皮素处理下Bim蛋白与Bak、Bax蛋白的相互作用。结果 相比于常规T24细胞，顺铂耐药T24细胞对顺铂的敏感性显著下降。MTT和流式细胞实验结果表明槲皮素能显著促进顺铂对耐药T24细胞的杀伤活性和凋亡诱导活性。免疫共沉淀和Western blot试验结果表明槲皮素能显著上调顺铂耐药T24细胞中Bim蛋白的表达，从而通过与Bak、Bax蛋白的相互作用促进顺铂对肿瘤细胞线粒体膜孔道的开放，诱导细胞色素c和Smac/DIABLO从线粒体中释放到细胞质中，最终引起caspase-9和caspase-3的活化。结论 槲皮素通过Bim-Bak/Bax途径提高顺铂耐药膀胱癌细胞对顺铂的敏感性