人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗酶联免疫检测法的建立及其应用

目的 建立人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗(HPV16 L2E6E7)酶联免疫的检测方法，用于疫苗发酵过程中的重组蛋白表达的监控。方法 用常规方法制备兔抗HPV16 L2E6E7多克隆抗体作为包被抗体，商品化小鼠抗HPV16 E7单克隆抗体为检测抗体，夹心ELISA方法检测HPV16 L2E6E7抗原参考品，建立抗原标准曲线，确定线性范围及检测限，同时验证该方法的特异性。结果 建立了检测HPV16 L2E6E7抗原含量的夹心ELISA方法，抗原参考品系列浓度在19.53~1 250 ng?mL-1内有很好的线性(R2>0.99)和回收率(90%~110%)；特异性好，不受发酵液中宿主菌蛋白的干扰。结论 建立了人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗重组抗原含量的测定方法，为该疫苗的发酵工艺的质控提供了有效技术手段