橡胶草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A基因 表达的初步分析

分析橡胶草HMGR基因的表达情况，构建原核表达载体，转化BL21菌株并诱导表达。构建细胞融合表达载体，转化GV3101菌株并侵染洋葱表皮细胞，在共聚焦显微镜下观察基因表达情况。构建植物过表达载体并侵染烟草，利用紫外分光光度法检测三萜含量的变化。通过IPTG诱导和SDS-PAGE检测，获得分子量为62.659 1 ku的蛋白，与预期蛋白相符合，且37 ℃诱导6 h时表达最明显；通过激光共聚焦显微镜观察，该基因主要在细胞膜上表达；紫外可见分光光度法表明转基因烟草中三萜的含量高于空白烟草。橡胶草HMGR基因分别在大肠杆菌、洋葱鳞片内表皮和烟草中成功表达