利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体

将hAPOA1的阅读框连接到原核表达载体pGEX-4T-1中，构建成正确的pGEX-4T-1-hAPOA1原核表达质粒，然后将其转入宿主菌BL21，经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后，宿主菌表达出与预期分子量大小相符的55.4 ku的融合蛋白；将纯化后的包涵体融合蛋白免疫新西兰大白兔，制备抗hAPOA1血清并检测抗体效价。结果表明，经间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)及蛋白质免疫印迹(Western Blot)方法证实，获得的融合蛋白免疫新西兰大白兔得到了特异性的多克隆抗体，抗体效价为1 ∶40 000，经济效益可观