枸杞棉蚜SSR-PCR反应体系的建立与优化

采用单因素法和L25(55)正交试验设计进行简单重复系列PCR(SSR-PCR)反应体系优化，并对引物退火温度进行筛选，以建立适宜枸杞棉蚜的SSR反应体系和扩增程序。结果表明，枸杞棉蚜SSR-PCR的优化体系总体积为25 μL，包括50 ng模板DNA，1.5U Taq DNA聚合酶，150 μmol/L Mg2+，300 μmol/L dNTPs，0.4 pmol/μL引物，优化后的检测体系更为经济有效；Ago66引物PCR适宜退火温度为58 ℃