大豆中不同除草剂作用靶标酶的miRNA前体克隆
Keywords: miRNA,EPSPS(5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶),基因序列,草甘膦,克隆
Abstract:
对前人已预测的大豆miRNA的4个茎环结构进行引物设计、克隆miRNA前体，先将设计好的接头与大豆小RNA的3′末端连接，然后利用与接头序列互补的引物对小RNA进行反转录，即可得到加接头的第1链cDNA，再用基因特异引物GSP和通用接头引物的组合，经PCR扩增后即可捕获位于已知序列区和接头之间的3′端RNA序列。结合3′端引物的测序结果，初步预测成熟miRNA可能的6个组合是同一家族
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