达氟沙星完全抗原的制备与鉴定

通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)法，将半抗原达氟沙星(danofloxacin，DAN)与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联，制备完全抗原DAN-BSA。对所制备的完全抗原通过FT-IR光谱、紫外光谱和SDS-PAGE进行分析确证，并通过测定免疫血清的效价和IC50对其免疫原性进行检测。结果表明，DAN-BSA的FT-IR光谱较BSA和DAN均有变化；紫外光谱扫描中，DAN-BSA的最大吸收波长较BSA和DAN有所偏移；SDS-PAGE电泳中DAN-BSA的条带较BSA条带上移，说明DAN-BSA的分子量大于BSA；免疫原性检测中，血清的效价达到256 000，IC50值为 28.84 μg/L，说明所制备的完全抗原具有免疫原性。综上可知，完全抗原DAN-BSA成功合成，可以用来免疫动物制备抗体，这为后续免疫学检测方法的建立奠定了良好的基础