苦皮藤素V对东方粘虫中肠V-ATP酶AB亚基复合物水解ATP活性的抑制作用

苦皮藤素V是一种对昆虫具有毒杀活性的化合物，从植物苦皮藤（Celastrus angulatus Max）中分离出来。目前，已发现苦皮藤素V可与粘虫中肠液泡型ATP酶（V-ATPase）的H、B和a亚基结合，但是其具体作用机理还尚不清楚。本研究将大肠杆菌(Escherichia coli)中表达得到的东方粘虫中肠V-ATPase A亚基突变体TSCA和V-ATPase B亚基包涵体洗涤、溶解后进行复性，获得可溶性AB亚基复合物后采用亲和层析纯化。将纯化好的AB亚基复合物测定H+K+-ATPase活性，证明其有ATP水解活性。随后，测定苦皮藤素V对复合物ATPase的抑制活性，发现加入苦皮藤素后，复合物ATPase活性降低。因此，其可能是通过抑制了AB亚基复合物的ATPase活性，从而产生了杀虫效果，证明AB亚基复合物为苦皮藤素V的潜在靶点之一。这为了解苦皮藤素与VATPase相互作用机制打下了基础，也为进一步开发新型杀虫药物奠定了基础