农杆菌GV3101中反式玉米素合成基因促进烟草再生

胭脂碱型农杆菌GV3101已经被广泛用于植物遗传转化研究。已有的研究结果证明，农杆菌GV3101株系含有的反式玉米素合成 (trans-zeatin synthesizing，tzs)基因编码产物会影响烟草细胞器的形态及细胞的生理状态。然而，有关tzs基因对遗传转化过程外植体再生的影响研究却少有报道。本文在前期研究工作的基础上，以2种烟草、4个农杆菌株系为组培实验材料，验证了胭脂碱型农杆菌tzs基因产物的生理活性。结果表明：以外源添加生长调节物质的外植体为阳性对照，在不添加任何生长调节剂的培养基上，与GV3101菌株共培养的烟草外植体能分化再生，并发育成完整植株；外植体再生与GV3101携带的质粒种类无关；外植体与农杆菌GV3101培养液共培养24 h，烟草再生效果较好；与GV3101株系共培养24 h，将外植体烟草叶片匀浆，经亲和柱分离纯化后，检测出烟草外植体叶片中高达0.78 ng/g FW-1的反式玉米素含量。菌落PCR扩增结果证实，农杆菌GV3101株系有tzs基因序列。以上结果表明，农杆菌GV3101株系内的tzs基因的表达产物有生理学活性，能够促进烟草外植体再生，调节细胞生长