依托泊苷影响HEK293细胞同源重组修复体系

抗肿瘤药物疗效的研究多集中在肿瘤细胞，目前针对正常细胞的研究颇少，有必要建立能进行定量分析的同源重组定量修复体系。我们已建立的模型可以探讨肿瘤药物化疗后对HEK293细胞DSBs修复的继发性后果。通过构建含有带I-SceⅠ酶切位点的同源介导的重组修复底物（homologous direct recombination, HDR），或单链退火修复（single strand annealing, SSA）底物的细胞株，定量检测依托泊苷 (etoposide,VP-l6)对同源性重组修复(homologous recombination, HR)通路的影响。成功构建了可用于定量检测DNA双链断裂(double-strand break, DSBs)诱导的SSA和HDR修复的正常人HEK293细胞应用模型。细胞毒结果证实，与SSA/293对照组对比，VP-16给药组 16 μmol/L（0.475±0.029 vs 1.000±0.000, P<0.001)细胞活力明显降低；与HDR/293对照组相比，VP-16 给药组16 μmol/L（0.458±0.188 vs 1.000±0.000, P<0.05)细胞活力降低。此外，本研究证实，VP-16抑制SSA修复，VP-16给药组 2 μmol/L与SSA/293对照组相比（0.575%±0.177% vs 1.352%±0.195%, P<0.05），修复效率降低；VP-16抑制HDR修复，VP-16给药组1 μmol/L与HDR/293对照组修复效率相比（0.305%±0.078% vs. 0.635%± 0.049%，P<0.05)，修复效率降低。VP-16诱导DNA损伤的同时，抑制HDR修复和SSA修复，修复效率呈现剂量依赖性。本研究结果可为抗肿瘤药物的临床应用提供某些指导