促红细胞生成素对缺氧缺血性脑损伤保护作用机制的研究

摘要 目的 构建新生儿缺氧缺血性脑病的经典动物模型,并分析在缺氧缺血条件下,促红细胞生成素(EPO)治疗前后胶质细胞谷氨酸运载蛋白2(EAAT2)表达情况。方法 108只出生72 h的SD乳鼠随机分为六组:空白对照组、单纯缺氧组、单纯缺血组、缺氧缺血组、促红细胞生成素治疗组和生理盐水治疗组。缺氧缺血性脑病模型通过双侧结扎颈动脉并且缺氧处理2 h建立。观察并记录不同实验组中乳鼠行为的变化。利用蛋白质印迹技术从蛋白质水平上分别检测不同实验组中EAAT2蛋白的表达情况。利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术从mRNA水平上分别检测不同实验组中新生乳鼠的海马区、大脑皮层EAAT1、EAAT2的基因表达情况。结果 模型呈现典型的缺氧缺血脑病特征。缺氧、缺血、缺氧缺血都可以导致海马组织、大脑皮层中EAAT1的mRNA水平及EAAT2表达量的降低。经过EPO治疗后,EAAT1及EAAT2的基因表达量明显上升。并且,大脑皮层中基因表达水平要高于海马组织中基因表达水平。结论 EAAT2表达量的下降可能是HIE发病的一个原因,EPO的疗效可能是通过上调EAAT2的表达量来实现