杂交兰种苗超低温脱毒技术研究

摘要 以携带建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)的杂交兰根状茎为试材，采用包埋玻璃化超低温保存法对杂交兰病毒脱除进行研究。结果表明：低温炼苗21 d的茎尖，在0.5 mol/L的蔗糖浓度预培养基中培养3 d，然后浸入0.4 mol/L高糖液体培养基中加载90 min，之后转入玻璃化溶液PVS2(protect vitrification solution 2)中冰上处理6 h，再液氮保存1 h，最后于37℃水浴中解冻2~3 min，1.2 mol/L高糖液体培养基中卸载20 min，待恢复培养后，杂交兰茎尖成活率为64%以上，随机检测30个样品，两种病毒脱毒率均为100%。研究为杂交兰种苗脱毒奠定了一定的理论基础