稻曲病菌T-DNA插入突变体B2510的插入位点分析

摘要 以稻曲病菌TDNA插入突变体库中致病力减弱突变菌株B2510为材料，通过分析TDNA插入位点的侧翼序列和突变基因，分离出在稻曲病菌致病过程中起作用的基因。通过测定突变菌株B2510的生长速率、产孢能力及致病力发现，与野生型菌株P1相比，B2510田间接种表现为致病性减弱；在MM培养基上生长速率下降，而在PSA和TB3培养基中生长速率与野生型没有显著差异，但丧失产孢能力。Southern杂交显示TDNA在突变菌株B2510中以双拷贝形式插入，利用TAILPCR技术扩增紧邻TDNA两侧的侧翼序列，经过比对分析发现，TDNA分别插在基因UV8b_1412的启动子区域和UV8b_1386的下游3′端，且稻曲菌基因组序列均未丢失，TDNA上只有几个碱基发生变化。半定量RTPCR分析基因的表达情况，显示两个基因在突变体B2510的表达量较P1均显著下降，推测TDNA插入位点处的基因与稻曲病菌致病性相关，可能在某一阶段参与调控稻曲病菌在水稻上的致病过程