一个水稻小热休克蛋白的异源表达及寡聚特性分析

摘要 【目的】在前期研究中，本实验室已克隆了一个水稻小热休克蛋白基因(OsSHSP17.6)，并发现该基因的表达明显受到热激和病毒侵染调控，表明该蛋白可能在逆境胁迫过程中起重要作用。本研究的目的在于进一步明确OsSHSP17.6的特性。【方法】在本研究中，进一步将该基因亚克隆至原核表达载体pET-32a并导入大肠杆菌E. coli BL21(DE3)pLysS诱导表达，通过亲和层析的方法纯化了该重组蛋白，进一步用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting分析。【结果】异源表达的重组OsSHSP17.6能减轻IPTG对宿主菌的毒害。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting分析显示纯化的重组OsSHSP17.6蛋白在体外能形成同源二聚体和寡聚体。【结论】这些结果支持OsSHSP17.6是一个有功能的分子伴侣蛋白并表明该蛋白可能通过形成同源寡聚体的方式参与逆境胁迫反应，这为进一步明确OsSHSP17.6的功能机制奠定基础