热稳定性对甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌的影响

摘要 甲基对硫磷水解酶可生物降解有机磷农药，由于其特殊的应用价值，越来越受到人们的关注。来源于苍白杆菌的甲基对硫磷水解酶MPH-Och在毕赤酵母系统中不能有效地分泌表达。将热稳定性提高的突变体MPH-S274Q在毕赤酵母中表达，发现其毕赤酵母重组菌株经摇瓶诱导培养120 h后，培养上清的酶活力达到0.7 U/mL，蛋白分泌量是野生型的14倍，SDS-PAGE电泳图中培养上清有明显的蛋白质条带，进一步证明了分泌效率提高,该结果表明提高蛋白质的热稳定性可以作为提高外源蛋白在毕赤酵母中的分泌效率的一条有效途径