白菜型油菜MPK12基因克隆及表达分析

【目的】克隆白菜型油菜‘陇油6号’MPK12基因的全长cDNA序列，研究其组织表达特异性，分析MPK12基因在低温、盐、ABA和H2O2处理下的表达情况，以阐明MPK12基因在油菜中的生物学功能。【方法】利用RACE技术克隆MPK12基因cDNA全长，并对其全长基因进行生物信息学分析；构建系统发育树，研究其与相似序列的同源性；利用实时荧光定量PCR方法，分析MPK12基因的组织表达特异性以及在低温、盐、ABA和H2O2逆境胁迫下的表达情况。【结果】油菜MPK12基因cDNA全长1 395 bp，包括5′-UTR 69 bp，3′-UTR 207 bp，开放阅读框1 119 bp，编码372个氨基酸，预测蛋白质分子量42.6 ku，理论等电点为7.9，二级结构主要包括α-螺旋和不规则卷曲。多序列比对和系统进化分析表明，油菜MPK12与拟南芥AtMPK12具有很高的同源性，为90.7%。实时荧光定量PCR结果显示,MPK12基因在油菜根、茎、叶、芽和种子中均有表达，没有组织特异性；同时，该基因的表达受低温、盐、ABA和H2O2胁迫诱导。【结论】克隆得到油菜MPK12基因，其在油菜适应逆境胁迫过程中发挥作用