华南虎源禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究

【目的】对福建梅花山华南虎繁育研究所一例华南虎幼虎急性死亡病例的致病菌进行分离鉴定及生物学特性研究，为圈养华南虎疫病防控提供科学依据。【方法】无菌采取死亡幼虎的肺、肝、脾、肠道等组织病料，进行细菌分离培养，根据形态特征、培养特性、生化试验、16S rRNA PCR扩增结果进行病菌鉴定；并对该分离菌进行16S rRNA系统进化分析、禽致病性大肠杆菌PCR鉴定、药敏试验、动物致病性试验和毒力基因检测。【结果】从幼虎肝脏及肠道组织中分离得到1株大肠杆菌（E.coli），命名为FJ/Tiger2016。16S rRNA系统进化分析显示，该分离菌与大肠杆菌人源分离株（NZCP016497）、鼠源分离株（NZMBNX01000003）、鸭源分离株（EF620926）及禽源分离株（AB272358）的遗传距离较近，形成一个相对独立的小遗传分支，其中与禽源分离株（AB272358）的同源性高达99.7％。PCR鉴定及药敏试验结果表明，该分离菌为禽致病性大肠杆菌（APEC），对选用的15种抗菌药均表现敏感。动物致病性试验结果显示，经腹腔接种时该菌株对试验小鼠具有较强的致病力，小鼠攻毒后5 h内全部死亡。病理剖检及组织病理切片观察结果表明，该菌株对死亡小鼠的心脏、肝脏和脾脏等多个重要组织器官均造成了较为严重的病理损伤，而经灌胃接种时试验小鼠均未出现明显的临床症状。毒力基因检测结果显示，该菌株含有10种毒力基因，暗示其可能具有很强的致病性。【结论】从死亡幼虎肝脏及肠道组织中分离到1株具有较强致病力、肠道外致病的禽致病性大肠杆菌，表明禽致病性大肠杆菌已对我国圈养华南虎造成了一定威胁，应引起重视