小麦条锈菌转录因子PsSte12的克隆及生物学分析

【目的】克隆小麦条锈菌PsSte12基因，明确其序列特征、转录活性及其在小麦条锈菌侵染过程中的相对表达量。【方法】采用RT-PCR方法，从小麦条锈菌中获得PsSte12基因，利用生物信息学分析其序列特征，实时定量PCR技术检测其在小麦条锈菌不同侵染阶段的表达特征；借助酵母单杂交系统解析该基因的转录活性。【结果】克隆到1个小麦条锈菌基因PsSte12，该基因序列含有1个全长2 553 bp的开放阅读框；基因组DNA序列含有4个内含子，分别位于开放阅读框第281，429，1 512，1 584位，长度分别为73，79，66和68 bp。该基因编码蛋白含850个氨基酸,75个正电荷残基和90个负电荷残基。PsSte12与小麦秆锈菌、杨树锈菌、小麦赤霉菌及构巢曲霉菌中同源序列的相似性分别为87.9%，61.53%，24.3%和25.2%；PsSte12在小麦条锈菌侵染后24和36 h大量表达，相对表达量分别为对照的61倍和123倍；PsSte12具有转录活性，其N端为转录激活区。【结论】成功克隆了小麦条锈菌STE类型转录因子PsSte12，证实其具有转录活性，在小麦条锈菌侵染早期诱导表达，推测其参与了小麦条锈菌的侵染过程