来航鸡FOXL2基因的真核表达及纯化

【目的】对来航鸡FOXL2基因进行真核表达及纯化，为其生物学功能研究奠定基础。【方法】根据GenBank已发表的来航鸡FOXL2基因序列(GenBank登录号：JF＿708868.1)设计引物，以来航鸡全血DNA为模板，PCR扩增FOXL2基因，经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后定向克隆于pPICZαA 中，获得pPICZαA-FOXL2真核表达载体。将pPICZαA-FOXL2转化毕赤酵母菌GS115，用甲醇进行诱导表达，对表达产物进行SDS PAGE和Western blotting检测。【结果】克隆了918 bp的FOXL2基因；成功构建了pPICZαA-FOXL2真核表达载体；实现了FOXL2基因在毕赤酵母菌GS115中的融合表达，获得了分子质量约为37 ku的重组蛋白FOXL2，经Western blotting 检测其具有较好的生物学活性。【结论】成功地在毕赤酵母中表达了来航鸡FOXL2基因