心肌细胞氧化损伤对 myocardin 和 核因子 E2 相关因子 2 的影响

利用过氧化氢（H2O2）建立大鼠心肌细胞氧化损伤模型；观察心肌细胞氧化损伤过程中 myocardin 和核因子 E2 相关因子 2（Nrf2） 的表达变化并初步探讨 myocardin 对 Nrf2 的影响。通过转染质粒过表达目的基因，转染 shRNA 质粒下调目的基因表达；通过磺酰罗丹明 B（SRB）比色法检测细胞增殖，通过 Real-time PCR 检测 mRNA 的表达，通过 Western blot 检测蛋白的表达。结果显示 200 μmol/L H2O2 孵育 24 h 为最佳 H2O2 氧化损伤条件；H2O2 抑制 myocardin mRNA 及蛋白的表达，同时增加 Nrf2 mRNA 及蛋白的表达；过表达 myocardin 基因或者下调 Nrf2 基因后相对活细胞数较对照组明显减少，而下调 myocardin 基因或者上调 Nrf2 基因后相对活细胞数较对照组明显增多；过表达 myocardin 基因后检测到 Nrf2 mRNA 和蛋白表达出现明显下调，而下调 myocardin 基因后检测到 Nrf2 mRNA 和蛋白表达明显上调。因此推断 myocardin 基因可能抑制细胞增殖，而 Nrf2 基因可能促进细胞增殖；H2O2 造成大鼠心肌细胞氧化损伤过程中激活 Nrf2 相关抗氧化损伤信号途径，其机制可能是通过下调 myocardin 的表达而实现的