熊果酸对人骨肉瘤细胞 U2-OS 增殖及凋亡的影响研究

目的 探讨熊果酸对人骨肉瘤细胞 U2-OS 增殖以及凋亡的影响，分析其作用机制。 方法 取人骨肉瘤细胞株 U2-OS 分为 4 组，分别采用浓度为 0、10、20、40 μmol/L 的熊果酸进行培养。培养 0、24、48、72 h，应用细胞计数试剂盒 8（cell counting kit 8，CCK-8）检测细胞增殖能力变化；培养 48 h，使用流式细胞术测定熊果酸对骨肉瘤细胞周期和凋亡的影响，应用实时荧光定量 PCR 和 Western blot 检测周期蛋白 cyclin D1 的表达和凋亡相关蛋白 Caspase-3 的表达和活化情况。 结果 CCK-8 检测示，培养 0、24 h 时各组吸光度（A）值比较，差异无统计学意义（P>0.05）；48、72 h 时随浓度增加A 值逐渐减小，各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术检测示，随熊果酸浓度增加，U2-OS 细胞的 G1 期增加、S 期及 G2/M 期减少，细胞凋亡率逐渐增加，各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。与 0 μmol/L 组相比，10、20、40 μmol/L 组 cyclin D1 mRNA 及蛋白相对表达量下调（P<0.05）；各组间 Caspase-3 mRNA 相对表达量比较差异无统计学意义（P>0.05）；但随熊果酸浓度增加，Caspase-3 前体蛋白下降，活化的 Caspase-3 增加，各组间差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 熊果酸能有效抑制 U2-OS 细胞增殖，诱导 cyclin D1 表达下调导致细胞在 G0/G1 期阻滞，同时使 Caspase-3 活化增加进而促进细胞凋亡