人TCF21基因真核表达载体的构建及稳定转染肺腺癌顺铂耐药细胞系A549/DDP的建立
Construction of eukaryotic expression vector of human TCF21 and establishment of stably transfected human lung adenocarcinoma cisplatin-resistant cell line A549/DDP

目的 建立稳定高表达人转录因子21(TCF21)基因的肺腺癌顺铂耐药细胞系(A549/DDP)。方法 从人肝癌细胞HepG2中提取总RNA，应用RT - PCR技术获得人TCF21基因的cDNA，并构建pEGFP - N1 - TCF21真核表达载体；用脂质体转染A549/DDP细胞，经G418筛选获得稳定表达人TCF21基因的细胞系；运用RT - PCR、Western - Blot技术对细胞系进行鉴定。结果 成功构建了人TCF21基因真核表达载体，建立了能够稳定高效表达人TCF21基因的A549/DDP细胞系。结论 TCF21基因真核表达载体的构建及稳定转染A549/DDP细胞系的建立为探究其逆转人肺腺癌细胞耐药的作用及其分子机制奠定了坚实的实验基础。