可视化金黄色葡萄球菌LAMP检测方法的建立及应用
Development and application of loop-mediated isothermal amplification assay for rapid visual detection of S. aureus

目的 建立一种基于颜色判断结果的金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）快速、敏感和特异的环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP）方法并应用于食源性疾病样品的金葡菌筛查。方法 针对金葡菌耐热核酸酶（thermostable nuclease, nuc）基因特异性序列的6个区域设计2对引物，建立LAMP方法。利用LAMP和普通PCR方法同时检测金葡菌和对照组菌株来验证LAMP方法的特异性；将金葡菌菌液作10倍系列稀释后利用LAMP和PCR方法同时进行检测来评价两者的敏感度，利用LAMP和PCR方法分别对330份食源性疾病样品进行检测来比较两者的检出率。结果 LAMP方法可以利用肉眼进行结果判断，其特异性与普通PCR相当，但其敏感性比普通PCR高10倍，LAMP方法检测下限为10 cfu/ml，PCR方法检测下限为100 cfu/ml；LAMP和普通PCR方法对食源性疾病样品的检出率相符。结论 可视化金葡菌LAMP方法是一个快速、敏感和特异的方法，可应用于食源性疾病样品中金葡菌的筛查。