流感病毒在狗肾上皮细胞上的最优培养条件
Optimal culture conditions of influenza virus in renal epithelial cells of dog

目的 优化不同亚型流感病毒在狗肾上皮细胞(MDCK)上最优培养条件,提高不同亚型流感病毒在MDCK细胞上的分离效果。方法 将甲型H1N1、H3N2、Victoria、Yamagata四种亚型的流感病毒以不同的培养条件:不同培养温度、不同培养基、不同的牛血清浓度、不同L-1(对-甲苯磺酰)苯丙胺酰氯甲酮(TPCK)胰酶浓度、不同的接种量、不同的接种时间接种到MDCK细胞上,在24h、48h、72h、96h取培养物上清测血凝滴度,比较不同亚型流感病毒在MDCK细胞病变速度和病毒含量的差异。结果 甲型H1N1流感病毒的最优培养温度为35℃,DMEM培养基,无牛血清,TPCK胰酶浓度为1-3μg/ml,接种300ml,不吸附或吸附1.5-3.0小时;H3N2病毒的最优培养温度为34℃,DMEM培养基,无牛血清,TPCK胰酶浓度为1μg /ml,吸附1.5小时,接种300ml;Victoria流感病毒的最优培养温度为35℃,DMEM培养基,无牛血清,TPCK胰酶浓度为0.5-2.0μg /ml,接种200ml,吸附1.5小时;Yamagata流感病毒的最优培养温度为35℃,DMEM培养基,无牛血清,TPCK胰酶浓度为1μg /ml,接种200ml,吸附1.5小时。结论 根据流感病毒不同亚型来选择流感病毒的培养条件可获得更好的实验结果。