胞内分枝杆菌HSP 65基因克隆、分析及其原核表达的研究
Cloning of Mycobacterium intracellulare HSP 65 and its analysis and prokaryotic expression

摘要：目的　克隆胞内分枝杆菌HSP 65基因，对其进行生物信息学分析与原核表达。方法　应用巢式PCR克隆胞内分枝杆菌HSP 65基因，利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。构建原核表达载体pET 15b-HSP 65并进行诱导表达。结果　胞内分枝杆菌HSP 65基因完整ORF基因全长1 626 bp，编码541个氨基酸。HSP 65蛋白为酸性、亲水性蛋白质，亚细胞定位主要存在于细胞质，蛋白二级结构以α-螺旋、无规则卷曲及β-折叠为主。使用同源建模法预测了HSP 65基因编码蛋白三维立体结构。试验构建pET 15b-HSP 65原核表达载体并成功表达。结论　成功克隆胞内分枝杆菌HSP 65基因，并对HSP 65蛋白进行了生物信息学分析及原核表达。