状芽胞杆菌鉴定用荧光PCR方法的建立
The establishment of real-time quantitative PCR methods for the Clostridia identification

目的 建立梭状芽胞杆菌属水平和丁酸梭菌、产气荚膜梭菌2个种水平上的荧光PCR快速鉴定方法。方法 针对梭状芽胞杆菌基因序列中属特异性和种特异性基因设计引物和探针，优化荧光PCR方法反应参数和条件，并用标准菌株、分离株和牛奶样品对方法准确性和灵敏度进行验证。结果 建立的荧光PCR方法在梭状芽胞杆菌属和2个种水平鉴定时，准确性均可达100%；纯梭状芽胞杆菌菌种鉴定的灵敏度均为102 CFU/g（ml），牛奶样品经18～20 h增菌后梭状芽胞杆菌鉴定的灵敏度为102CFU/g（mL）。结论 所建立的梭状芽胞杆菌鉴定用荧光PCR方法在属和种的鉴定上均有较好的准确性和灵敏度，能够实现纯菌种和样品中梭状芽胞杆菌的快速、准确鉴定。