结核分枝杆菌ESAT-6 His融合蛋白的原核表达及纯化
Prokaryotic expression and purification of His-tagged ESAT-6 protein in Mycobacterium tuberculosis

摘要：目的 构建含有His标签结核分枝杆菌esat-6基因的原核表达质粒，并在体外进行原核表达和纯化。方法 提取结核分枝杆菌基因组DNA，对其采用聚合酶链反应技术扩增esat-6基因，并构建至表达载体pET28a上。将测序正确的载体转化大肠杆菌BL21，然后对His-ESAT6融合蛋白通过IPTG诱导进行表达，最后对重组蛋白使用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹进行分析。结果 PCR扩增出结核分枝杆菌esat-6基因，成功构建至表达载体pET28a-ESAT-6上,并在体外优化表达，产生高水平的目的蛋白表达产物。结论 成功构建并表达了含有His标签的ESAT-6融合蛋白，为临床中预防和治疗结核病提供了有效的参考。