噎膈血瘀证患者血清对食管癌EC9706细胞增殖 及PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响
Effect of Serum of Blood-Stagnation-Syndrome patients with Esophageal cancer on the Proliferation of Esophageal Carcinoma EC9706 Cells and its Expression of PI3K/Akt signaling pathway proteins

摘要：目的　通过观察血瘀型噎膈患者血清对食管癌EC9706细胞增殖、形态变化及PI3K/Akt介导的信号通路蛋白表达的影响，探讨食管癌瘀血内结证候形成的分子机制。方法　将EC9706细胞于37℃，5%饱和湿度的CO2培养箱孵育24 h，饥饿24 h，分别加入倍比梯度的血瘀证、脾气虚证患者和健康人血清，MTT染色法检测细胞增殖变化；光镜下观察各组间细胞形态；Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路蛋白表达差异。结果　血瘀型噎膈患者血清刺激细胞的50%增殖率为711 μl/10 ml培养液体积，光镜观察，该型噎膈患者血清刺激细胞呈长梭形改变，细胞连接成网状；在PI3K/Akt信号通路中，血瘀型噎膈患者血清对EC9706细胞蛋白EGFR、PI3K、Akt、p-Akt和 NF-κB的表达具有特征性促表达作用，与其他各血清干预的细胞比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　噎膈血瘀证患者血清提供利于细胞增殖的微环境，该证候的分子机制与PI3K/Akt信号通路蛋白超标达密切相关。