氯喹抑制肾癌细胞活性促进舒尼替尼诱导的细胞凋亡

摘要： 目的：研究氯喹（经常用于抑制自噬体与溶酶体的融合，是一种晚期自噬的抑制剂）是否能抑制肾癌细胞的增殖以及对舒尼替尼(sunitinib, ST)诱导的细胞凋亡的影响。方法：以肾癌细胞系786-O和ACHN为模型，利用3-(4，5-二甲基)-5-(3羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物检测法［3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt, MTS］观察氯喹对细胞活性的影响；透射电子显微镜、免疫杂交等手段检测氯喹影响ST诱导的凋亡、自噬的情况。应用早期自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)、RNA干扰技术敲降自噬相关蛋白Ulk1 (unc-51-like kinase 1)和微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(microtubule associated protein 1 light chain 3 fusion protein, LC3)确定早期自噬对ST引起的细胞凋亡的影响。结果：氯喹和ST均可以抑制786-O和ACHN细胞的增殖，氯喹可促进ST诱导的细胞凋亡。与氯喹不同，抑制早期自噬减少了ST诱导的细胞凋亡和活性丢失。结论：舒尼替尼既可以引起细胞自噬，也可以促进细胞的凋亡；早期、晚期自噬对ST诱导的细胞凋亡作用不同，氯喹可以作为一种潜在的抗肾癌药物进行相关的临床研究