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- 2015
大肠杆菌topA-细胞中tetA-cfaABCE的高效转录促进DNA凝集
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Abstract:
为深入了解大肠杆菌topA-突变体中转录对DNA结构的影响,以编码一个tetA-cfaABCE共转录单元的质粒pJGX15A为研究对象,利用氯喹-琼脂糖凝胶电泳比较了大肠杆菌HB101 (topA+, gyrB+)与DM800 (topA-, gyrB225) 细胞中pJGX15A质粒的拓扑结构状态,发现DM800细胞中pJGX15A存在一种特殊的凝集结构。这种结构在氯喹-琼脂糖凝胶电泳中具有较高的迁移率,而且呈现“弥散”状态而不是清晰的拓扑条带。进一步的研究表明培养基中的四环素质量浓度以及细胞生长时相均会影响pJGX15A在DM800细胞中的结构,而凝集结构只出现在四环素质量浓度低于6 μg/mL时的对数期DM800细胞中。原子力显微镜照片显示这种结构并非典型的互缠式超螺旋结构,而是含有不同程度的分子内凝集,部分DNA分子高度凝集为一团