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- 2015
转基因猪细胞中CMV启动子区域甲基化的研究
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Abstract:
为研究转基因猪外源基因表达与启动子区域甲基化的关系，利用流式细胞仪检测体外传代至第5、10和15代的转基因猪成纤维细胞中EGFP荧光强度的变化情况；采用亚硫酸盐测序的方法对这3代细胞CMV IE启动子区域30个CpG岛的甲基化程度进行测定。结果显示细胞从第5代培养到第10代时荧光变弱，但是当继续培养到15代时EGFP荧光又渐渐变强，但EGFP阳性细胞的比例没有发生变化，均为100%。第5、10、15代细胞启动子区域的CpG岛甲基化阳性率分别为3.64%±1.25、2.97%±1.03和1.65%±0.74，统计结果表明3代细胞间的甲基化阳性率差异不显著（P>0.05）。表明转基猪成纤维细胞中CMV启动子区域的甲基化程度随着体外培养时间的变化不明显，与EGFP的表达水平变化无明显相关
