多重降落PCR检测血流感染产ESBLs肠杆菌科细菌与MRSA方法的建立和应用

目的探索一种可同时检测产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的肠杆菌科细菌与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重降落PCR方法。方法收集某院20l3年3月—2014年9月102份住院患者血培养阳性标本，针对产ESBLs肠杆菌科细菌的SHV、TEM、OXA基因和MRSA的MecA基因设计4对特异性引物，分别采用单一降落PCR和多重降落PCR对各耐药基因进行扩增，并将结果与药敏纸片法进行比较。结果各单一PCR均可扩增出特异性条带，并用多重降落PCR同时检测了4种耐药基因；建立的多重降落PCR对4种耐药基因（MecA、SHV、TEM、OXA）DNA的检测下限分别为4.37、2.19、4.53和3.59 ng。与药敏纸片法相比，多重降落PCR总灵敏度与特异性分别为100.00％、88.24％，检测ESBLs的灵敏度达100.00％，特异性为87.23％，检测MRSA的灵敏度和特异度均为100.00％。结论该实验建立的多重降落PCR具有高灵敏度与特异性，可用于产ESBLs肠杆菌科细菌和MRSA所致血流感染的快速诊断与流行病学调查，有利于指导临床使用抗菌药物