应用通用引物PCR检测诊断细菌和真菌性中枢神经系统感染的价值

目的了解细菌和真菌性中枢神经系统（CNS）感染病原谱，并探讨通用引物聚合酶链反应（PCR)检测技术的病原学诊断价值。方法收集某院2009年1月—2015年3月疑似或确诊CNS细菌或真菌性感染患者资料，分析其脑脊液培养病原菌种类，采用细菌16S rRNA和真菌28S rRNA通用引物对患者脑脊液DNA进行PCR扩增和序列测定，并与同期脑脊液培养及鉴定结果进行比较。结果共收集确诊或疑似CNS细菌或真菌感染者400例，其中脑脊液培养阳性132例。共分离病原菌150株，其中革兰阳性菌48株，革兰阴性菌90株，真菌12株；居前3位的细菌为鲍曼不动杆菌（32株）、凝固酶阴性葡萄球菌（16株）和肺炎克雷伯菌（13株）；最常见真菌为新生隐球菌（8株）。选取88份感染患者脑脊液标本和20例非感染患者脑脊液进行PCR扩增，PCR扩增法灵敏度（35.23％，31/88）高于培养法（28.41%，25/88）（χ2＝4.17，P＜0.05）。PCR扩增和培养法阴性预测值分别为25.97%、24.10%，两种方法的特异度、阳性预测值均为100.00%。PCR扩增测序与培养结果符合率为84.00%（21/25）；PCR检测平均报告时间（48 h）较培养结果报告时间（细菌平均约72 h，真菌平均约96 h）更快速。结论CNS 感染病原分布广泛，以革兰阴性菌为主；通用引物PCR检测具有快速、灵敏、准确等特点，具有良好的临床推广和应用价值