乙醛脱氢酶2减轻多柔吡星所致细胞毒性作用的机制
Mechanisms for inhibitory effect of ALDH2 on doxorubicin-induced cytotoxicity in C2C12 myogenic cell line

目的：探讨乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2，ALDH2)对多柔吡星(doxorubicin，DOX)所致肌原细胞毒性的保护作用及其机制。方法：以小鼠C2C12肌原细胞为研究对象，通过基因转染方式调节细胞内ALDH2表达水平，以流式细胞术检测细胞凋亡率，MTT法检测细胞增殖抑制率，化学荧光法检测组织活性氧(reactive oxygen species，ROS)、4羟壬烯醛(4-hydroxynonenal，4-HNE)蛋白加合物含量及caspase-3/7活性，Western印迹检测Bcl-2，NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2，NOX2)、胞浆调节亚单位p-p47PHOX水平。结果：ALDH2过表达可显著降低DOX所致C2C12细胞凋亡及增殖抑制，而抑制ALDH2的表达则增加DOX对C2C12细胞凋亡诱导及增殖抑制作用；ALDH2过表达可下调p47PHOX磷酸化水平，抑制NOX2活化及ROS生成，而ALDH2低表达则上调p47PHOX磷酸化水平，促进NOX2活化及ROS生成；此外，NOX2活性抑制剂apocynin可抑制p47PHOX磷酸化、ROS生成及caspase-3/7的酶活性，同时增加 ALDH2酶活性及其mRNA水平。结论：DOX所致的肌原细胞毒性与NOX2依赖性细胞氧化应激增强、ALDH2酶活性及表达降低有关，而ALDH2通过抑制上述NOX2信号，减轻细胞凋亡而发挥保护细胞作用