Fasudil对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠致脑炎性T细胞的免疫调节作用
Immunoregulative effect of Fasudil on encephalomyelitic T cells in experimental autoimmune encephalomyelitis mice

目的：探讨法舒地尔(Fasudil)修饰的脾单个核细胞(mononuclear cells，MNCs)治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)的疗效及可能的分子机制。方法：雌性C57BL/6小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35–55诱导，建立主动免疫EAE模型，免疫后第9天制备脾MNCs，和/无Fasudil培养。作用72 h后收集上述细胞，检测T细胞亚群的变化、Rho激酶(Rho kinase，ROCK)活性和细胞因子水平；以5×107个细胞/只小鼠腹腔注射诱导，建立被动转移EAE模型，并将小鼠分为PBS-MNCs组和Fasudil-MNCs组，每组8只。观察各组小鼠临床评分和体质量变化。结果：免疫第9天EAE小鼠脾致脑炎性MNCs可通过被动转移实验诱导EAE模型的建立，而体外Fasudil修饰的MNCs不能诱导EAE的发生；与PBS-MNCs组相比，Fasudil-MNCs组小鼠体质量减轻较少(P<0.05)。体外实验显示：Fasudil处理的MNCs ROCK活性降低(P<0.01)；Fasudil可抑制IFN-γ和IL-17的CD4+T细胞比例(IFN-γ：P<0.01；IL-17：P<0.05)，并增强TGF-β和IL-10的CD4+T细胞分泌(均P<0.001)；此外，Fasudil可降低细胞因子IL-17水平(P<0.001)和增强细胞因子IL-10分泌(P<0.05)。结论：Fasudil介导的细胞治疗通过抑制辅助性T细胞1(helper T cell 1，Th1)和Th17炎性反应，促进Th2免疫调节作用，影响EAE的发生和发展