高海拔地区圈养大熊猫粪便可培养细菌分析——以云南野生动物园春季为例
Identification and Analysis of the Culturable Bacterium in the Feces of Captive Giant Pandas in High-altitude: Taking Yunnan Wildlife Park in Kunming in Spring for Example

中文摘要：本研究旨在对高海拔地区圈养大熊猫春季粪便中可培养微生物进行细菌学鉴定与分析。以云南野生动物园3只成年雌性健康大熊猫的春季昼间新鲜粪便为试验材料,经稀释、分离、纯化、保存,通过菌落特征、染色特性、显微形态观测及16S rDNA序列分析等方法鉴定了粪便中可培养细菌种类与数量。结果表明:粪样共分离出12株细菌菌株,鉴定归为6属8种,即大肠杆菌 Escherichia coli、短小芽孢杆菌 Bacillus pumilus、琼氏不动杆菌 Acinetobacter junii、葡萄球菌 Staphylococcus sp.、枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis、寡养单胞菌 Stenotrophomonas sp.、芽孢杆菌 Bacillus sp.和索氏志贺菌 Shigella sonnei,其中优势菌是大肠杆菌和芽孢杆菌属,菌落数分别为(15.93±3.10)×10 7 cfu·g -1 和(13.33±3.87)×10 6 cfu·g -1,但存在个体间差异(Kruskal-Wallis H test, P< 0.05);各时段粪样分离得到菌落数量比较稳定,差异无统计学意义(Friedman test, P> 0.05)。研究结果可为大熊猫健康状况监测、合理日粮和肠道微生态等深入研究提供基础资料和科学依据。
英文摘要：This experiment was conducted to study the variety and number of culturable bacteria in the feces of there adult female giant pandas ( Ailuropoda melanoleuca) under captive condition in Yunnan Wildlife Park with high-altitude in spring. Apparent differences were observed in colony shape, color, surface texture and 16S rDNA sequence after identification. The results showed that, a total of 12 strains of bacteria were isolated including 6 genera, 8 species (4 Escherichia coli, 1 Bacillus pumilus, 1 Acinetobacter junii, 1 Staphylococcus sp., 1 Bacillus subtilis, 1 Stenotrophomonas sp., 2 Bacillus sp., and 1 Shigella sonnei). Among of the identified strains, 6 of them (4 Escherichia coli and 2 Bacillus sp.) were dominant strains. There were significant differences of the numbers of Escherichia coli and Bacillus sp. among the individuals (Kruskal-Wallis H Test, P< 0.05). Moreover, the population of isolated strains were not the same in different periods of the daytime (Friedman Test, P> 0.05). Our results provided basic data and information for the monitor of the health status, food menu arrangement and the intestinal florae changes of the giant panda. 2015,34(6): 852-858 收稿日期：2015-02-06 DOI：10.11984/j.issn.1000-7083.20150057 分类号：Q959.8;Q93-331 基金项目：云南省森林灾害预警与控制重点实验室开放基金项目(ZK14A301) 作者简介：周杰珑(1976—),男,副教授,主要从事野生动物保护与利用研究,E-mail:zhjiel@163.com *通讯作者：刘丽,女,博士研究生,高级实验师,主要从事病理微生物研究,E-mail:cathly@126.com 参考文献： 常金拴, 王爱霞. 1995. 一株琼氏不动杆菌的分离[J]. 上海医学检验杂志, 10(2): 100. 陈晓明, 赖文凤, 谢建蒙. 2011. 一例黑猩猩志贺氏菌性痢疾的诊治[J]. 广东畜牧兽医科技, 36(3): 25, 30. 崔明全, 何廷美, 钟志军, 等. 2013. 大熊猫粪便菌群ERIC-PCR指纹图谱的分析及优势菌群的鉴定[J]. 畜牧与兽医, 45(9): 6-11. 戴欣, 陈月琴, 周惠, 等. 2000. 海洋细菌的分子鉴定分类[J] . 中山大学学报: 自然科学版, 39(1): 68-71. 邓军. 2012. 枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌混合饲喂对新生仔猪先天免疫系统的影响[D]. 南京: 南京农业大学. 范秀容, 李广武, 沈萍. 1998. 微生物实验(第二版)[M]. 北京: 高等教育出版社. 冯友军, 魏捷. 2002. Internet与免费生物学资源[J]. 西北轻工业学院学报(增刊), 20: 142-144. 何明清. 1994. 动物微生态学[M]. 北京: 中国农业出版社: 146-172. 何廷美, 崔婷婷, 钟志军, 等. 2012. 成年大熊猫肠道菌群多样性的16S rDNA-RFLP分析[J]. 中国兽医科学, 42(11): 1121-1127. 黄菁华, 张荣昌,