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- 2016
拟南芥DELLA蛋白编码基因RGA和GAI的原核表达和多克隆抗体制备 Prokaryotic expression and polyclonal antibodies preparation of the DELLA Protein-coding gene,RGA and GAI,in ArabidopsisKeywords: 拟南芥,DELLA蛋白,原核表达,包涵体,多克隆抗体 Abstract: 通过聚合酶链反应方法扩增了RGA和GAI两个拟南芥DELLA蛋白基因,并将其克隆到pGEX-4T-3原核表达载体上,转化大肠杆菌Rosetta菌株,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达了分子量为90 kD的GST-RGA和分子量为85 kD的GST-GAI融合蛋白,这两种融合蛋白均以包涵体的形式存在.将包涵体直接作为抗原免疫新西兰白兔,制备出多克隆抗体血清,血清效价超过1:400 000.WB分析结果表明这两种抗体可以特异性识别拟南芥RGA和GAI蛋白,为进一步研究DELLA蛋白的调控机制奠定了基础
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