神经红蛋白突变体H64V与叠氮离子的作用

摘要 将64位组氨酸（His64）突变为缬氨酸（Val），构建了神经红蛋白（Ngb）突变体H64V基因并进行了蛋白的表达纯化，突变使Ngb的血红素Fe由六配位结构变成五配位结构.利用光谱法研究了突变体H64V与叠氮离子（N3-）的相互作用.紫外-可见吸收光谱表明，H64V与N3-键合后其Soret带吸收峰由406 nm红移至418 nm；荧光光谱表明N3-可使H64V的荧光发生静态猝灭.计算得到了H64V与N3-键合的平衡解离常数和热力学参数.另外，还研究了不同阴离子对H64V与N3-结合的影响，发现阴离子的存在减弱了N3-与H64V之间的结合力