分子印迹空心球在蛋白质固相萃取中的应用

摘要 建立了分子印迹固相萃取-高效液相色谱相结合分离复杂样品中牛血红蛋白（Hb）的方法.以单分散的二氧化硅球为载体，Hb为模板，采用表面印迹法制备了分子印迹空心球（MIHS）.采用透射电子显微镜（TEM）对该印迹材料的形貌进行了表征.结果表明，所制备的MIHS的单分散性好、粒径均匀，是一种理想的固相萃取填料.以该印迹材料作为固相萃取吸附剂，并结合高效液相色谱（HPLC）研究了其对Hb的吸附行为，结果表明，制备的MIHS在磷酸盐缓冲液（pH=7.0）中对Hb的回收率高于80%，而对核糖核酸酶A（RNase A）和细胞色素C（Cyt C）的回收率低于50%，方法的精密度高（RSD<5%）.与Hb印迹硅球相比，MIHS具有较快的传质速率和萃取效率.将MHIS应用于复杂样品中Hb的分离，结果表明，MIHS可以从加标牛血清中选择性吸附Hb，吸附率达82%