磁性氧化石墨烯固定化氯过氧化物酶及其在奥酸性蓝45脱色中的应用

摘要 以氧化石墨烯和Fe3O4为原料制备磁性氧化石墨烯，采用吸附法将氯过氧化物酶固定在磁性氧化石墨烯上，考察了固定化体系缓冲溶液pH值、固定化时间及反应温度对固定效果的影响.以氯过氧化物酶催化氧化奥酸性蓝45染料脱色反应为模型反应，探讨了固定化氯过氧化物酶的操作稳定性.实验结果表明，pH=3.5，反应15 min、反应温度15℃为固定化氯过氧化物酶的最佳催化条件；采用共沉淀法制备载体，加入的NH4Fe（SO4）2·12H2O与氧化石墨烯（GO）质量比为10.7∶1时，得到的磁性氧化石墨烯（TMGO）的酶固载量大于二者质量比为5.35∶1时得到的磁性氧化石墨烯（FMGO），这可能与FMGO氧化石墨烯表面的Fe3O4含量不足有关；与游离酶相比，固定化氯过氧化物酶表现出更好的酸碱稳定性、H2O2稳定性、热稳定性和储存稳定性，在35~50℃，聚集或堆积的磁性氧化石墨烯（TMGO）片层打开，导致固定化酶活损失率明显小于游离酶.重复使用5次后，TMGO-氯过氧化物酶（CPO）的相对活性仍然保持在60%以上