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南京师范大学学报(自然科学版) 2018
基因编辑方法研究进展――以大肠杆菌基因敲除方法为例DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2018.03.016 Keywords: 大肠杆菌, 基因修饰, Red同源重组, CRISPR/Cas技术 Abstract: 大肠杆菌是分子生物学的重要研究对象,是生产氨基酸、有机酸和重组蛋白等物质的主要微生物. 在分子生物实验中,常常不需要完整的大肠杆菌基因序列,这时如何截取所需要的基因序列就成了值得研究的问题. Red同源重组是大肠杆菌基因敲除的传统方法,主要利用自身的RecA同源重组系统编码中RecA和RecBCD蛋白,介导DNA进行同源重组. 几经技术革新,但该系统仍然存在很多不足. 基因组编辑三大技术是TALEN、ZFN和CRISPR/Cas,其中的CRISPR/Cas技术更是当今世界上最具发展前景的革命性基因修饰技术
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