杉木炭疽菌遗传转化及附着胞发育过程的细胞核行为观察

【目的】建立高效的杉木炭疽菌遗传转化体系,并观察附着胞发育过程中的细胞核行为。【方法】通过菌丝体酶解的方法制备原生质体,PEG介导的原生质体转化法将含有伯莱霉素抗性的细胞核表达质粒NL1::GFP转入受体材料杉木炭疽菌SMCG1#C菌株,通过荧光显微镜跟踪观察附着胞发育过程中的孢子、芽管和附着胞等结构中的细胞核行为。【结果】获得了稳定表达NL1::GFP质粒的杉木炭疽菌阳性转化子; 杉木炭疽菌附着胞发育过程伴随着细胞的有丝分裂与细胞核的转移; 附着孢发育成熟后,孢子和芽管菌丝中的细胞核仍然保持完整。【结论】建立了高效的杉木炭疽菌遗传转化体系; 杉木炭疽菌与稻瘟病菌、希金斯炭疽菌的附着胞发育过程的细胞生物学特性显著不同