共载siRNA与多西他赛的透明质酸修饰的还原敏感型纳米粒质量评价

研究和评价共载特异性抑制环氧化酶(COX-2)表达的小干扰RNA(siRNA)和多西他赛(DTX)的透明质酸修饰二硫键交联的聚乙酰亚胺(PEIss)与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)形成的还原敏感型肿瘤靶向纳米粒(DTX/siCOX-2/HRPSP NPs)的体外质量。首先，通过溶剂挥发法制备DTX/siCOX-2/HRPSP NPs，同时制备不含二硫键交联的透明质酸修饰的PEI-PLGA纳米粒(DTX/siCOX-2/HPP NPs)作为对照。结果显示，两者NPs 呈核壳圆形，粒径处于150~200 nm之间，体外释放实验表明，DTX/siCOX-2/HRPSP NPs中的DTX在24 h内呈现缓释行为，且HRPSP NPs 在pH 5.0中8 h时的累积释药量较pH 7.4中释药量高10%~25%，证明酸性条件更有利于纳米粒中DTX的释放，具有肿瘤微环境敏感性。体外细胞摄取实验表明，当N/P比为40/1，孵育时间在14~16 h时，纳米粒的摄取量最高，受体靶向抑制试验显示，HRPSP NPs能特异性结合CD44受体，具有肿瘤细胞靶向性。最后，通过Western blot方法测定不同纳米粒对细胞内Bcl-2，bax，caspase-3和COX-2蛋白的相对表达效率。结果显示，实验组与对照组相比，促凋亡蛋白bax和caspase-3显著增加，抗凋亡蛋白Bcl-2显著下降，COX-2蛋白的表达也相应降低，尤其以DTX/siCOX-2/HRPSP NPs组最为明显(P<；0.01)，实现了小分子药物和siRNA协同特异性治疗的目的