MiR-217对小鼠胰腺成体干细胞增殖的调控作用

为了进一步研究miR-217在小鼠胰腺成体干细胞生长过程中的调控作用，在培养的胰腺成体干细胞中过表达miR-217，用Western blot和免疫荧光的方法检测miR-217对细胞增殖的影响。结果显示，miR-217能够明显抑制胰腺成体干细胞增殖相关蛋白Cyclin D1和Ki-67的表达。使用生物信息学软件预测miR-217的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因的方法验证了miR-217对靶点的靶向性，实验结果表明，miR-217能够抑制PMIR-REPORT-Sirt1-3′UTR荧光素酶活性。进一步在二维培养的胰腺成体干细胞中，过表达miR-217检测Sirt1的表达变化，qPCR和Western blot表明在胰腺成体干细胞中miR-217能够抑制Sirt1的蛋白水平的表达，但对mRNA水平没有影响。在胰腺成体干细胞中分别加入Sirt1的抑制剂尼克酰胺和激动剂白藜芦醇，尼克酰胺能够抑制胰腺成体干细胞的增殖，而白藜芦醇促进了胰腺成体干细胞的增殖。以上结果说明，miR-217通过Sirt1调控胰腺成体干细胞的生长，低表达的miR-217有助于维持胰腺成体干细胞的增殖