新型双功能融合蛋白GAD的PEG-马来酰亚胺修饰及其性质研究

为了解决新型双功能融合蛋白GAD复性困难、具有免疫原性等问题，采用PEG-马来酰亚胺修饰变性后的GAD包涵体。通过圆二色谱、色氨酸荧光分析等方法对比修饰前后GAD构象变化，并采用OGTT、脂清除实验验证其生物学活性。研究结果表明，PEG-马来酰亚胺能够完成变性条件下GAD的定点修饰，提高其复性效率，且修饰产物二、三级结构与修饰前一致；PEG-GAD的免疫原性降低(P<0.01)，具有显著的降糖降脂作用(P<0.001)，且体内药效时间延长。此方法可为强疏水性多肽类药物的开发提供有效策略