克氏原螯虾泛素结合酶E2基因的克隆及其在卵巢中的表达分析

利用RACE技术获得了UB-E2基因cDNA全长，通过RT-PCR技术研究UB-E2基因在不同组织、发育时期的表达量和17α-羟孕酮激素刺激后UB-E2表达量及性腺发育情况。结果表明：该基因序列全长3 943bp，开放阅读框675 bp，编码224个氨基酸，相对分子量23.93 ku，等电点8.61，82~219位氨基酸序列为泛素结合酶家族特有的结构域。氨基酸序列比对发现，克氏原螯虾UB-E2基因与节肢动物UB-E2基因有较高的同源性；系统进化分析表明，UB-E2基因与凡纳滨对虾和斑节对虾聚为一支。荧光定量结果显示，UB-E2基因在克氏原螯虾卵巢组织中的表达量显著高于其他组织（P < 0.05）；在卵巢发育初期表达量最低，随后逐渐升高，到产卵后期开始下降；17α-羟孕酮刺激结果显示，试验组卵巢发育速度明显加快，同时UB-E2基因的表达量也显著上升，卵巢发育速度和UB-E2基因表现为受17α-羟孕酮刺激响应一致。推测UB-E2基因在克氏原螯虾的卵巢发育和配子发生中起着重要的作用，本研究为克氏原螯虾性腺发育分子调控机制提供一定的理论依据