西藏开菲尔粒中Lactobacillus kefiri的分离与鉴定

Lb.kefiranofaciens是西藏开菲尔粒中的优势菌株，约占乳酸菌总数的95%。通过分离纯化，构建克隆文库并结合16S rRNA基因测序、变性梯度凝胶电泳（DGGE）、菌落PCR和显微镜观察等手段分析了开菲尔粒中的非优势乳酸菌Lb.kefiri。扫描电镜显示，其细胞形态呈短杆状（0.8～1.5×0.6～0.7 μm），比Lb.kefiranofaciens短，且细菌聚集生长的趋势更为明显。在所构建的克隆文库中，25个菌落经测序分析，发现有1条序列属于Lb.kefiri。以开菲尔粒为样品，通过分离纯化，应用菌落PCR方法验证的22个单菌落中，有5个单菌落是Lb.kefiri。此外，对开菲尔粒进行PCR-DGGE检测，发现4个开菲尔粒样品中都有Lb.kefiri的存在。这些结果都证明了Lb.kefiri在开菲尔粒中稳定存在且所占比例相对较小，是一种非优势乳酸菌