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ISSN: 2333-9721
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植物研究  2018 

盐穗木HcDMC1的原核表达和抗血清的制备
Prokaryotic Expression of Halostachys caspica HcDMC1 and Preparation of Its Antiserum

DOI: 10.7525/j.issn.1673-5102.2018.03.012

Keywords: 盐穗木,HcDMC1,原核表达,融合蛋白,抗血清,
Halostachys caspica
,HcDMC1,prokaryotic expression,fusion protein,antiserum

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Abstract:

DMC1是减数分裂过程中同源染色体配对和重组修复所必需的减数分裂特异蛋白。根据盐胁迫下盐穗木转录组数据库,克隆获得的盐穗木DNA损伤修复基因命名为HcDMC1。为深入分析盐穗木HcDMC1基因的耐盐功能,通过原核表达获得盐穗木HcDMC1的融合蛋白,用于免疫小鼠制备特异性的HcDMC1抗血清。结果表明,利用pET30a-HcDMC1能够在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白His-HcDMC1,纯化融合蛋白His-HcDMC1的含量为1.0 mg·mL-1。每次每只小鼠免疫接种50 μg融合蛋白,三次免疫接种后进行抗体效价及特异性检测。ELISA检测抗血清滴度约为1:400 000,Western Blot检测证明了抗血清的特异性。本研究制备的小鼠抗血清能够为盐穗木HcDMC1蛋白的功能鉴定和免疫检测提供实验材料。

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