烟草乙烯转录因子ERF基因NtTOE3的克隆、载体构建及表达分析
Cloning,Construction of Expression Vector and Expression Analysis of the Ethylene-responsive Factor ERF Gene NtTOE3 in Nicotiana tabacum

ERF（Ethylene-responsive factor）是一类具有AP2特征结构域的乙烯应答转录因子，在响应植物的逆境胁迫应答中起关键作用。为明确ERF家族成员TOE3在烟草中的生物学功能和调控机制，同源克隆普通烟草K326中NtTOE3基因cDNA全长，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）表征基因表达模式，结合生物信息学分析，对基因功能和调控机制进行初步预测。结果表明，该基因全长1 356 bp，编码451个氨基酸残基，预测分子量为49.84 ku。生物信息学分析表明，该蛋白是一个亲水蛋白，可能定位在细胞核，且与美花烟草（Nicotiana sylvestris）NsTOE3有96%的同源性，故命名为NtTOE3。组织表达分析发现，该基因在烟草根、茎、叶、花中均有表达，其中茎中表达量最高。逆境胁迫试验表明，该基因能快速响应低钾、高盐、干旱、H2O2、ABA和4℃等逆境处理。表明NtTOE3转录因子在烟草非生物胁迫中起着重要调节作用。