核桃JrGRAS2基因响应热胁迫的表达及功能分析
Expression and Function Analysis of Walnut JrGRAS2 Gene under Heat Stress

GRAS转录因子在植物响应逆境中起重要作用。为更好的了解核桃（Juglans regia）在逆境胁迫下的适应机制，本研究从‘香玲’核桃转录组中克隆获得一条GRAS基因（命名为JrGRAS2），对其在不同高温胁迫下的表达进行分析，并将该基因插入酵母表达载体pYES2中构建重组载体pYES2-JrGRAS2，将pYES2-JrGRAS2转入酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）INVSCI，同时以转化pYES2的重组酵母作为阴性对照，在酵母表达系统中研究该基因的抗热胁迫功能。结果显示，该基因开放读码框（ORF）全长1296bp，拟推导的蛋白分子量为47405.83Da，含有氨基酸数为431，理论等电点为5.66。在热胁迫下，JrGRAS2基因被显著诱导，特别是在36℃胁迫0.5h的茎内，其表达相对于对照被上调了335.5倍。对两种酵母进行热胁迫，发现转JrGRAS2基因酵母表现出较对照更高的生存活性。表明JrGRAS2基因具有响应热胁迫的能力，且能提高酵母的抗性，JrGRAS2基因可作为核桃逆境应答的重要候选基因。